氨基酸，是含有堿性氨基和酸性羧基的有機化合物。羧酸碳原子上的氫原子被氨基取代后形成的化合物。動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官，尿液中氨基酸的變化能反映肝、腎的生理狀態(tài)。另外，氨基酸還能反映灼傷、傷寒等方面情況。植物體內氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。

 

氨基酸分析儀測定氨基酸含量
氨基酸分析儀是一種基于液相色譜法（LC）或液質聯(lián)用法（LC-MS）的精密儀器，用于快速準確地測定樣品中氨基酸的種類和含量。這種方法在食品科學、生物化學、臨床醫(yī)學及環(huán)境科學等領域廣泛應用。
液相色譜法（LC）測定氨基酸含量
● 實驗原理：
液相色譜法通常結合離子交換柱分離和柱后茚三酮衍生化技術進行氨基酸的定量檢測。樣品中的蛋白質首先經過酸水解，釋放出游離氨基酸，然后通過陽離子交換柱實現(xiàn)氨基酸的分離。各氨基酸按照它們與離子交換樹脂的親和力差異依次洗脫出來，隨后與茚三酮反應生成有色物質，z后在紫外分光光度計或熒光檢測器上測定吸光度或熒光強度，從而計算出每種氨基酸的含量。
● 操作步驟：
1. 樣品處理：將待測樣品進行適當?shù)念A處理，包括蛋白質的完全水解以及可能的凈化步驟。
2. 樣品注入：制備好的樣品溶液被注入到氨基酸分析儀的進樣口。
3. 色譜分離：氨基酸在特定的離子交換柱上依據(jù)電荷和大小的不同得到分離。
4. 茚三酮衍生化：從色譜柱流出的氨基酸立即進入衍生化反應系統(tǒng)，與茚三酮試劑發(fā)生反應形成有顏色的衍生產物。
5. 檢測與定量：生成的衍生物通過檢測器（如紫外吸收檢測器），測量其吸光度并轉化為濃度值，根據(jù)標準曲線計算氨基酸的精確含量。
液質聯(lián)用法（LC-MS）測定氨基酸含量
● 實驗原理：
液質聯(lián)用法利用高效液相色譜對氨基酸進行初步分離，之后經接口傳輸至質譜儀進行定性和定量分析。每個氨基酸具有獨特的質荷比（m/z），通過檢測離子的質量和強度可以準確識別和定量樣品中的氨基酸組成。
● 操作步驟：
1. 樣品提取與預處理：同樣需要先將樣品中的蛋白質水解為游離氨基酸，然后進行必要的純化和濃縮。
2. 液相色譜分離：氨基酸混合物通過液相色譜柱進行高分辨率分離。
3. 質譜檢測：分離后的氨基酸組分逐一進入質譜儀，通過電噴霧電離（ESI）或其他離子化方式轉化為氣態(tài)離子。
4. 數(shù)據(jù)采集與分析：質譜儀記錄下各氨基酸離子的質譜圖，通過對比數(shù)據(jù)庫信息或標準品譜圖來鑒定氨基酸，并根據(jù)離子峰強度定量氨基酸含量。

 

樣本量：粉末非純樣品一般提供2g左右，溶液樣品提供5-10ml（蛋白的大于1mg/mL）。特別注意：氨基酸測試分游離氨基酸和水解氨基酸，需要在測試之前確定好測試內容！ 交付內容:：提供測試譜圖及氨基酸濃度數(shù)據(jù)。 實驗周期：收到樣品后1-2周左右時間，具體實驗周期請預約前與e測試工作人員溝通確認。

 

采用氨基酸分析儀或者高效液相色譜測17種氨基酸（天門冬氨酸，蘇氨酸，絲氨酸，谷氨酸，脯氨酸，甘氨酸，丙氨酸，胱氨酸，纈氨酸，蛋氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，賴氨酸，組氨酸，精氨酸）